Solubilización de la membrana de espermatozoide humano con n-dodecil sarcosinato de sodio: II. Estudios sobre el extracto / Spermatozoa submitted to ionic detergent treatment: studen on the sodium n-dodceyl sarcosinate extract

El n-dodecil sarcosinato de sodio produce la solubilización del espermatozoide humano con algo de contaminación acrosomal. El extracto está compuesto por una mezcla de productos con pesos moleculares y características inmunológicas similares a las del plasma seminal humano. El hecho de que la antigenicidad se mantenga luego de la solubilización, hace que ésta sea un comienzo útil en el aislamiento de moléculas que juegan un papel en la infertilidad por causas inmunológicas

Solubilizacion de la membrana del espermatozoide humano con n-dodecil sarcosinato de sodio: I.accion del detergente / Solubilization of the membrane human spermatozoa: I. action of the detergent

Espermatozoides humanos fueron lavados con PBS y tratados com n-dodecil sarcosinato de sodio (Sarkosyl). El insoluble remanente estaba compuesto por cabezas, cuyas colas fueron cortadas a la altura del cuello o del segmento intermedio y cuyas membranas no sufrieron mayores danos, estando el acrosoma intacto y por pequenos corpusculos que podrian ser acrosomas aislados. Los resultados indican que la accion del detergente es de dos tipos claramente diferenciados: a)diseccion del espermatozoide con separacion de la cola y b)disolucion del mismo dejando el acrosoma intacto. El residuo conserva actividad inmunologica e inmunobiologica

El enlace O-glicosídico en glicoproteínas de plasma seminal humano / The linkage O-glycosidic in glycoproteins of human seminal plasma

La composición y estructura de los extremos terminales no reductores portadores de los determinantes antigénicos en las cadenas de oligosacáridos de las glicoproteínas del plasma seminal humano, han permitido deducir que estos componentes son fragmentos producidos por la degradación proteolítica endógena de las mucinas. Dado que las cadenas de hidratos de carbono unidas O-glicosídicamente a la serina y la treonina de la cadena peptídica dan lugar a una reacción de beta-eliminación en condiciones alcalinas suaves, hicimos uso del tratamiento alcalino para demostrar la presencia de enlaces lábiles al álcali en las muestras de plasma seminal humano y algunas fracciones glicoproteicas aisladas a partir del mismo. El análisis de los hidratos de carbono que se liberan durante ell tratamiento han permitido obtener información sobre la composición y estructura de este tipo de unidades de oligosacarídos. Hemos identificado al monosacárido involucrado en el enlace O-glicosídico a serina y treonina y hemos podido caracterizar, a través de la reacción de beta-eliminación en condiciones reductoras y no reductoras, las unidades de monosacáridos del extremo terminal reductor

Autoproteólisis del plasma seminal humano I / Autoproteolysis of the human seminal plasma I

Se midió el curso de la autoproteólisis del plasma seminal humano por determinación de la variación en el contenido de proteínas y la liberación de aminoácidos y péptidos de bajo peso molecular al medio, en muestras incubadas a 37§C, a pH 7,2 y a pH 3,5, y el efecto de la actividad enzimática a pH 7,2 con el agregado de tripsina o pronasa. Los resultados obtenidos han permitido demostrar que la proteólisis, aunque existente, es muy lenta, observándose una disminución del contenido proteico y un aumento de los aminoácidos libres, y que ciertas propiedades del plasma seminal, como la distribución de pesos moleculares aparentes o la antigenicidad, no resultan afectadas por la proteólisis debido, posiblemente, a que dichas propiedades están determinadas por la formación de agregados moleculares

Autoproteólisis del plasma seminal humano II: agregación molecular de los fragmentos proteicos y glicoproteicos / Autoproteolysis of the human semen plasma II: molecular aggregation of proteins and glycoproteins fractions

El plasma seminal humano fue analizado por ultracentrifugación en medios conteniendo detergentes y reactivos caotrópicos y por cromatografía de tamices moleculares sobre Sephadex G-100 y G-15 en condiciones desagregantes diferentes, y se calcularon los porcentajes de aminoácidos hidrofóbicos del mismo. Los resultados obtenidos indican que los fragmentos producidos por la proteólisis endógena de las proteínas y glicoproteínas constituyentes del plasma seminal humano interaccionan a través de mecanismos hidrofóbicos y polares, formando agregados moleculares. Estas propiedades de agregación son las que explican ciertos problemas de la biología de la reproducción largamente discutidos, como son: los diferentes resultados obtenidos por los autores en el análisis del plasma seminal humano por electroforesis, inmunoelectroforesis e inmunodifusión, las propiedades de los "antígenos de recubrimiento", la composición y propiedades del "factor de antifertilidad" de alto peso molecular, etc